PCR metoda (polimerazna lančana reakcija) je "zlatni standard" moderne DNK dijagnostike, veoma osjetljiv metod molekularne biologije. Metoda PCR se koristi u medicini, genetici, kriminologiji i drugim poljima. Često i uspešno se koristi u dijagnozi mnogih zaraznih bolesti.
Dijagnoza zaraznih bolesti putem PCR-a
PCR test omogućava otkrivanje ne samo patogena, već i jednog fragmenta inostrane DNK u ispitivanom materijalu. Ispitivani (biološki) materijal je: venska krv, epitelne ćelije i tajna genitalnog trakta, sperme, pljuvačke, sputuma i drugih bioloških izlučaka. Potrebni biološki materijal određuje navodna bolest.
PCR metoda u našem vremenu je, naravno, moćna dijagnostička alatka. Možda je jedini nedostatak studije njegova visoka cena.
Na listi bolesti, čije prisustvo može biti određeno metodom PCR:
- virusna i bakterijska pneumonija;
- tuberkuloza;
- ošamućice, rubela, parotitis;
- zarazni hepatitis svih oblika;
- salmoneloza, difterija;
- Helikobakterije i bolesti prouzrokovane infekcijama creva;
- STD (polno prenosive bolesti): gonoreja, klamidija, ureaplazmoza, sifilis, AIDS, genitalni herpes, gardnerellez i drugi.
STI skrining pomoću PCR metode
Za razliku od tradicionalnih analiza, PCR tehnika omogućava otkrivanje seksualno prenosivih infekcija (STI) čak i ako su njihovi simptomi potpuno odsutni. Za sakupljanje biološkog materijala, žene su iscrtane epitelne ćelije cervikalnog kanala, muškarci - struganje uretre. Ako je potrebno, PCR metoda izvodi studiju venske krvi.
Stoga, STI test pomoću PCR metode omogućava identifikaciju:
- virus humane imunodeficijencije (HIV);
- bledi treponemus (uzročnik sifilisa);
- Herpes simplex virus i citomegalovirus;
- ljudski papiloma virus (HPV);
- klamidija, toksoplazma, mikoplazme, ureaplazma i druge seksualne infekcije.
Ako se PCR analiza pravilno izvrši, verovatnoća lažnih pozitivnih rezultata je isključena. Odvojeno treba pomenuti i human papillomavirus (HPV) i važnost PCR metode za njegovu dijagnozu. Za razliku od onkocitološkog razmaza, PCR metoda može utvrditi specifičan tip HPV-a, naročito one onkogene tipove 16 i 18, prisutnost kojom se ugrožava žena sa tako ozbiljnom i često smrtonosnom bolesti kao rak grlića materice . Pravovremeno otkrivanje onkogenog tipa HPV metodom PCR često pruža mogućnost da spreči razvoj raka grlića materice.
Analiza imunoenzime (ELISA) i postupak lančane reakcije polimeraze (PCR): pluse i minusi
Koja je dijagnostička metoda bolja: PCR ili ELISA? Tačan odgovor na ovo pitanje ne postoji, jer u suštini dijagnoza uz pomoć ova dva istraživanja ima različite ciljeve. I češće se primenjuju metode IFA i PTSR u kompleksu.
PCR test je neophodan da bi se odredio specifični uzročnik infekcije, može se otkriti odmah nakon infekcije, uprkos odsustvu simptomatske manifestacije bolesti. Ovaj metod je idealan za otkrivanje skrivenih i hroničnih bakterijskih i virusnih infekcija.
Za razliku od PCR tehnike, ELISA metoda je dizajnirana da ne otkrije uzročno sredstvo infekcije, već imunološki odgovor organizma na njega, odnosno otkrivanje prisustva i količine antitela određenom patogenu. U zavisnosti od vrste otkrivenih antitela (IgM, IgA, IgG), može se odrediti faza razvoja infektivnog procesa.
Obe metode i PCR i ELISA imaju visoku pouzdanost (100 i 90%, respektivno). Ali važno je zapaziti činjenicu da analiza ELISA u nekim slučajevima daje lažno pozitivno (ako je osoba bila bolesna sa određenom bolestom u prošlosti) ili lažno negativna (ako je infekcija prošla relativno nedavno) rezultat.